尿蛋白檢測試劑盒（麗春紅比色法）說明書

產品簡介：

在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅S，離心，蛋白質-染料復合物被沉淀下來，將沉淀物加入堿性溶液溶解后，分光光度法檢測560nm處吸光度，計算蛋白含量。Leagene 尿蛋白檢測試劑盒(麗春紅比色法)主要用于定量檢測尿液中蛋白含量，較雙縮脲法靈敏，對白蛋白的敏感性比球蛋白要高。

 產品組成：

自備材料：

1. 蒸餾水
2. 離心管、試管
3. 比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)：

1. 取適量麗春紅S試劑(10×)，按1:9加入蒸餾水，稀釋至1×，室溫可保存2～3個月。
2. 取1ml蛋白標準配制液加入到蛋白標準(BSA)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白標準溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白標準溶液應-20℃保存。
3. 取適量20mg/ml蛋白標準，稀釋至濃度分別為0、200、400、600、800、1000、1200、1600μg/ml或所需濃度。特別提示：待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中；例如待測蛋白溶解于蔗糖中，亦取20mg/ml蛋白標準溶解于蔗糖中，一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解BSA稀釋液。稀釋后的蛋白標準也應-20℃長期保存。
4. 制作蛋白標準曲線： 各取100μl上述稀釋度的蛋白標準， 與測定樣本操作相同（見第6步） 。”0”號管空白調零，比色杯光徑1cm，560nm比色，制成標準曲線。

       5.半定量實驗：取3～5ml新鮮尿液轉移入小試管，滴加磺基水楊酸溶液3～4滴，形成界  面，立即觀察，如有渾濁，提示尿液中含有蛋白質，渾濁深淺表示含量多少。?

        6.取離心管，根據上述半定量實驗測得的蛋白濃度按下表要求加入待測樣本和蒸餾水，再加入1ml 1×麗春紅S試劑，混勻。3500g離心10min，將上清緩緩倒出后，倒置于濾紙上數分鐘，用濾紙條吸附管壁上多余的試劑(勿觸及管低沉淀)。再加入2ml Alkaline Buffer至沉淀中，充分混合使沉淀溶解。