弧菌檢測培養基可采用121℃ 高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20% 如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應從無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50℃ 左右的培養基中。
在日常中有關弧菌檢測培養基常見問題有哪些?
1、能用肉眼判斷其pH值嗎?
答:酚紅的含量與普通培養基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。
2、緩沖系統是什么?
答:平衡鹽一般是由無機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統、Earle′s系統等。199系列培養基、MEM系列培養基均有Hanks′系統的培養基及Earle′s系統的培養基。但是有些培養基均不是以上常規的平衡鹽系統,例如RPMI 1640培養基、F12培養基。清培養基的平衡鹽系統也不是常規的平衡鹽系統,該平衡鹽系統的緩沖能力強于常規平衡鹽系統的緩沖能力。
5.、放置在冰箱中的培養基顏色會發生變化,為什么?
答:培養基保存于4℃冰箱中,培養基內CO2 會逐漸溢出,造成培養基越來越偏堿性。而培養基中酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。偏堿后再用于細胞培養將造成細胞生長停滯或死亡。偏堿時,可以通入無菌過濾的CO2,以調整pH值。