冰凍切片組織TUNEL測定試劑盒產品說明書

主要用途

冰凍切片組織TUNEL測定試劑是一種旨在使用標準化的化學方法，包括固著、封阻、通透等完整步驟，從存檔中的冰凍組織切片中探尋DNA斷點，即運用修飾過的核苷酸，在末端脫氧核糖核酸轉移酶（TdT）的幫助下，對DNA單鏈或雙鏈上斷點處的3’末端進行標記，原位探測和定量分析單細胞水平的DNA降解狀況的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于冰凍組織切片的DNA降解測定。廣泛用于細胞凋亡的研究。產品嚴格無菌，即到即用，反應敏感，操作簡捷，性能穩定。

用戶自備

小型染色缸：用于切片的清洗操作

光學顯微鏡：用于細胞染色后觀察分析

甲基綠復染試劑盒（GMS40010）：用于細胞染色后的復染

實驗步驟

一、樣品預處理

1． 取出10片待測的冰凍組織切片

2． 室溫下，小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿樣品表面

3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4． 小心加上100微升固著液（Reagent B），鋪滿整個樣品表面

5． 室溫下孵育30分鐘

6． 小心移去切片上的固著液（Reagent B）

7． 室溫下，將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中，孵育2分鐘

8． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

9． 小心加上50微升封阻液（Reagent C），鋪滿整個樣品表面

10． 室溫下孵育30分鐘

11． 室溫下，將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中，孵育5分鐘

12． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

二、斷點標記處理

1． 小心加上50微升酶標液（Reagent D），鋪滿整個切片樣品表面

2． 在37℃濕潤的培養箱里，孵育1小時，保持濕潤，避免干燥

3． 小心移去切片上的酶標液（Reagent D）

4． 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘

5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

注意事項

1． 本產品為10次操作

2． 操作時，須戴手套

3． 封阻液（Reagent C）達到100％封閉效果，超過雙氧水封閉效果

4． 本產品為生物素標記，超過熒光素標記強度1000倍

5． 本產品無需POD轉換，直接在光學顯微鏡下觀察，既方便，又確保信號不受影響

6． 酶標液（Reagent D）嚴禁反復凍融

7． 清理液（Reagent A）50毫升置于小型染色缸里，可重復使用

8． 所有操作在室溫下進行，除操作中規定之外

9． 每次更換試劑溶液時，保持樣品表面基本晾干：可以使用餐巾綿紙吸干或槍頭抽掉

10． 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面

11． 染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察

12． 本公司提供系列細胞凋亡試劑產品

質量標準

1． 本產品經鑒定性能穩定

2． 本產品經鑒定顯色清晰