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    茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)說明書

    更新時間:2025-03-04點擊次數:452

    產品簡介:

    茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一,研究表明茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

    茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩定紫藍色化合物,以分光光度計540nm 處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較進而計算茶多酚含量,主要用   于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

    操作步驟(僅供參考):

    1、準備樣品:

    ①植物樣品:取 0.2g 植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水10ml,沸水浴浸提20min,用200 目細胞篩過濾,濾渣再繼續置于新的煮沸的10ml 蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min 離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存,用于茶多酚的檢測;綠茶等液體樣本可直接用該試劑盒測定。

    ②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可直接用本試劑盒測定。

    ③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當勻漿,5000r/min 離心 15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。

    高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當稀釋。

    2、配制系列茶多酚標準:用蒸餾水和茶多酚標準(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。


    加入物(μl)

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    茶多酚標準(1mg/ml)

    10

    25

    50

    150

    250

    400

    蒸餾水

    490

    95

    450

    350

    250

    100

    相當于茶多酚含量(μg/ml)

    20

    50

    100

    300

    500

    800


    、3.TP 加樣:按照下表設置空白管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡;如果樣品中的 TP 濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行管,求平均值。

    加入物(ml)

    空白管

    標準管

    測定管

    蒸餾水

    0.5

    0.25

    0.25

    系列茶多酚標準(1~6 號)

    0.25

    待測樣品

    0.25

    TP 顯色液

    0.5

    0.5

    0.5

    TP Assay Buffer

    1.5

    1.5

    1.5

    4、TP 測定:以空白調零,比色杯光徑 1.0cm,分光光度計測定 540nm 處標準管、測定管的吸光度。

    計算:

    以系列茶多酚標準濃度(1~6 )(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標, 以對應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中 TP 含量。



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