酸溶血定性檢測試劑盒說明書

產品簡介：

紅細胞(Red blood cell，RBC)也稱紅血球，是血液中數量最多的一種血細胞，脊椎動物體內通過RBC運送氧氣，RBC同時還具有免疫功能。在貧血檢查中可通過蔗糖水溶血試驗來檢測紅細胞膜的缺陷，尤其適用于檢測陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH)，該癥為獲得性紅細胞膜缺陷引起的慢性血管內溶血，常在睡眠時加重，可伴發性血紅蛋白尿和全血細胞減少。

 酸溶血定性檢測試劑盒是利用PNH紅細胞對補體敏感性增高，在酸化的血清中經過37℃孵育，易溶血，血清經過56℃加熱30min，使補體滅活，病人紅細胞不溶解，該試劑盒主要用于檢測人、動物血液的紅細胞膜的缺陷，尤其用于鑒定陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥。該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。 

自備材料：

1、生理鹽水

2、與患者同血型的正常新鮮血液

3、水浴鍋

操作步驟(僅供參考)：

1、制備脫纖維血清：取患者和與患者同血型的正常人靜脈血 5ml，慢慢注入含有3個潔凈玻璃珠的小容器中，立即輕輕的持續搖動，直至纖維蛋白出現并附著于玻璃珠上為止(一    般需要 10～15min)。轉移脫纖維血至潔凈離心管，低速離心，取上清待用，即為脫纖維血清。

2、制備50%紅細胞懸液：取脫纖維血清，經生理鹽水洗滌3次，每次都應顛倒、混勻、離心，盡量吸棄上清液，留下紅細胞沉淀，加入等體積 PNH NaCl Buffer 重新懸浮紅細

胞，即為50%紅細胞懸液。

3、取試管6支，按下表先加入同血型正常人新鮮血清0.5ml，其中 3、6兩支試管在 56℃

水浴30min，使補體滅活，其余4管置于室溫 30min。此后按下表順序操作。

注意：如果PNH 患者第3管(加正常人滅活血清管)溶血，則說明此溶血不依賴于補體，故不是PNH，可能是紅細胞有其他缺陷(如球形紅細胞增多癥)，應做進一步鑒別。

參考區間：正常人無溶血。

注意事項：

1、 所用器具必須潔凈干燥，以免溶血造成假陰性。

2、 血清酸化后應注意密閉保存，盡快檢測，避免CO2逸出導致血清酸度降低，影響溶血程度。

3、 如果患者多次輸血，其血液中的不正常細胞會相應減少，可呈弱陽性或陰性。出現這種情況應延長孵育時間至 4～6h，再觀察溶血情況。

4、 該實驗可作為PNH的過篩實驗，陰性可排除 PNH，陽性應做酸化溶血實驗證實。

有效期：6個月有效。