產品名稱： PC-9/GR耐藥株;人肺腺癌細胞吉非替尼耐藥株

產品編號： JSK0259

細胞數量： 1*10^6

細胞種屬： 耐藥株

生長特性： 貼壁

培養基： DMEM

培養條件： 800ng/mL吉非替尼

細胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO）

細胞運輸： 干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

注意事項

凍存細胞接收后的處理：

1.干冰運輸，收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇；
2.收到細胞后，若發現干冰已經*揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。

復蘇細胞接收后的處理：

1.收到細胞后，請首先檢查培養瓶是否破損或漏液，培養液是否混濁，如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。
3.建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題，出現的細胞問題將不提供免費重發服務。

細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

八、試劑盒使用中的注意事項：
  1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用
  完，板條應裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
  3、各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣
  時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
  3、請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣
  本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定
  ，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。 
  4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
  5、底物請避光保存。 
  6、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準. 
  7、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 
  8、本試劑不同批號組分不得混用。

八、 PC-9/GR耐藥株;人肺腺癌細胞吉非替尼耐藥株合作單位：
  中國醫科大學、復旦大學、北京大學、貴陽醫學院、中國農業大學
  天津疾控中心、江南大學、山東大學、青島大學 、香港大學
  云南省產品質量監督檢驗研究院

上游產品 ：

下游產品：